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  • HPLC法測定脂溶性維生素分析方法

    發布于 2012/07/17閱讀(1832)來源 zxj標簽 HPLC

    摘要

    HPLC法測定脂溶性維生素分析方法:樣品中的維生素A 及維生素E 經皂化處理后,將其不可皂化部分提取至有機溶劑中。用高效液相色譜法C18反相柱將維生素A 和維生素E 分離,經紫外檢測器檢測,并用內標法定量測定。

    內容

    HPLC法測定脂溶性維生素分析方法

    高效液相色譜分析
    1.色譜條件(推薦條件)
    預柱:hypersil ODS 5μm,4mm×10cm;
    分析柱:hypersil ODS 5μm,4.6mm×25cm ;
    流動相:甲醇:水=98:2;混勻,于臨用前脫氣;
    紫外鹼測器波長:300nm;量程0.02;
    進樣量:20μL 進樣定量環;
    流速: 1.65~1.70mL/min
    2.樣品分析
    取樣品濃縮液20μL,待繪制出色譜圖及色譜參數后,再進行定性和定量。
    定性:用標準物色譜峰的保留時間定性。
    定量:根據色譜圖求出某種維生素峰面積與內標物峰面積的比值,以此值在標準曲線上查到其含量?;蛴没貧w方程求出其含量。
    3,計算
    X=C/m×V×100/1000
    X—某種維生素的含量(mg/100g);
    C—由標準曲線上查到某種維生素含量(μg/mL);
    V—樣品濃縮定容體積(mL);
    m:樣品質量(g)。
    用微處理機二點內標法進行計算時.按其計算公式計算或由微機直接給出結果。結果的允許測定結果相對偏差絕對值≤10%

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