1024人成网色www_91免费视频网站_黄色亚洲_欧美精品一国产成人性影视

當前位置: 首頁 > 分析方法 > HPLC法測定生物樣品中淫羊藿苷的濃度

熱賣產品

  • 高校、科研院所、質檢機構、化工等

    MA-1智能卡爾...

    高校、科研院所、

    29800.00

  • 制藥、化工、石油化工、食品等

    MA-1A全自動...

    制藥、化工、石油

    15000.00

  • 采用鹵素燈和SRA結構輻射熱組合

    MA-8精湛一代...

    采用鹵素燈和SR

    18800.00

  • 鋰電池水分 塑料粒子 卡氏爐

    KFDO-11型...

    鋰電池水分 塑料

    36000.00

  • 1000℃,7.2L,進口爐膛和加熱絲

    BA-4-10A...

    1000℃,7.

    10800.00

  • 新型 UP-40 超純水機 純水機

    UP-40超純水...

    新型 UP-40

    28800.00

  • 可同時進行達8樣品的處理

    SPE-8全自動...

    可同時進行達8樣

    29800.00

  • HPLC法測定生物樣品中淫羊藿苷的濃度

    發布于 2011/04/15閱讀(3950)來源 zxj

    摘要

    以苯甲酸為內標,建立了HPLC測定動物血漿、尿、糞及心、肝、脾、肺、腎等組織勻漿中淫羊藿苷的濃度。

    內容

    淫羊藿苷(Icariin,ICA)是來源于小檗科(Berberidaceae)淫羊藿(Epimedium)植物的主要有效成分。國內已有報道用紫外分光光度法[1]、高效薄層掃描法[2]及用外標法定量的高效液相色譜法3,4]測定淫羊藿制劑中淫羊藿苷的含量。有關生物樣品中淫羊藿苷濃度的測定方法國內外均未見報道,本文選擇了苯甲酸作內標,建立了生物樣品中淫羊藿苷高效液相色譜法,為進行淫羊藿苷的藥物動力學研究提供了一個靈敏、可靠的檢測手段。
    1 儀器、試藥和動物

    日本島津LC—6A高效液相色譜系統,SPD—6AV紫外檢測器;SCL—6A系統控制器;SIL—6A自動進樣器;CTO—6A恒溫箱;CR—3A數據處理機。ICA對照品由沈陽藥科大學植化教研室提供,純度在99%以上;苯甲酸對照品由中國藥品生物制品檢定所提供;淫羊藿提取液(含ICA 5mg/mL)由沈陽藥科大學藥劑教研室提供。甲醇為色譜純試劑,四氫呋喃、冰醋酸、乙酸乙酯均為分析純試劑。動物為Wistar大鼠,雌雄兼用,體重282~316g,由沈陽藥科大學動物室提供。2 色譜條件色譜柱:Zorbax ODS(10μm,4.6mm×250mm);流動相:四氫呋喃—水—冰醋酸(20∶75∶5);流速:1.0mL/min;紫外檢測波長:270nm;色譜柱柱溫:35℃;檢測靈敏度:0.02AUFS;紙速:2mm/min。3 生物樣品的處理3.1 血漿 取樣品0.1mL置10mL離心管中,加入乙酸乙酯3.5mL,振蕩3min,離心(2000r/min,5min),移取上清液,于50℃水浴用氮氣吹干,殘渣加內標液100μL,振蕩溶解后進樣20μL。3.2 糞和尿 大鼠糞便樣品室溫風干稱重后,置乳缽內研成細末,用生理鹽水按10%稀釋使成混懸液。取混懸液0.5mL及尿樣0.5mL用乙酸乙酯4.0mL提取2次,合并2次提取液,于50℃水浴用氮氣吹干,加入甲醇1.0mL,振蕩溶解后進樣10μL。3.3 組織勻漿 將大鼠斷頭處死取心、肝、脾、肺、腎、胃、肌肉、腦、睪丸各組織;稱重,用組織勻漿器制成生理鹽水勻漿,使每1mL含各組織0.4g,取此勻漿0.2mL,按血漿樣品處理,進樣分析。4 結果與討論4.1 色譜行為 在上述色譜條件下,ICA與內標、淫羊藿提取液中的其它6種成分及血漿內源物質得到良好分離,ICA及內標保留時間分別為:7.92、11.93min。

     

    4.2 標準曲線的制備 用甲醇精密配制成1mg/mL ICA標準貯備液,再用甲醇稀釋成100μg/mL標準工作液,置冰箱保存。另用甲醇制成1mg/mL內標貯備液,再用甲醇稀釋成40μg/mL標準工作液,置冰箱保存。用ICA標準工作液及空白生物樣品配制標準系列,同各樣品預處理操作,以ICA與IS峰高比為縱坐標,ICA濃度為橫坐標繪制標準曲線,計算回歸方程及相關系數。由于糞和尿中的代謝產物干擾內標色譜峰,因此糞和尿采用外標法,以ICA峰高為縱坐標,ICA濃度為橫坐標繪制標準曲線。結果血漿、尿、組織勻漿和糞的線性范圍分別為:1~128、2~32、2~32、4~64μg/mL。血漿的標準曲線方程(n=6)為:Y=0.122X-0.0099 r=0.9999其它生物樣品標準曲線方程的r值均大于0.99。4.3 回收率分別于空白血漿中準確加入一定量的ICA標準工作液,按上述方法經提取后進行HPLC分析,按血漿標準曲線方程測得濃度,求出方法回收率。標準品經提取后,與標準品直接進樣測定所得各對應標準品與內標峰高比值相比求得血漿樣品的提取回收率,見表1。其它生物樣品的方法回收率均大于95.26%,提取回收率均大于73.57%。

    表1 血漿樣品的回收率和精密度(n=5)

    藥物濃度
    (μg/mL)
     測定濃度
    (μg/mL)
     方法回收率
    (±SD,%)
     提取回收率
    (±SD,%)
      
     精密度RSD(%)
    日內 日間
     
    2
     2.02±0.06
     101.0±3.0
     80.35±3.5
     2.0
     3.0
     
    8
     8.42±0.46
     105.2±5.8
     81.41±4.5
     3.1
     5.5
     
    32
     31.23±0.76
     97.60±2.4
     81.07±2.0
     2.0
     2.6
     
    128
     129.7±4.84
     101.4±3.8
     83.63±3.1
     3.4
     3.7
     

     4.4 精密度 用空白血漿配制含ICA 2、8、32、128μg/mL樣品每種濃度各5管測定日內及日間誤差,結果見表1。其它生物樣品的日內、日間相對標準偏差(RSD)均小于7.1%。4.5 靈敏度測定 按色譜峰信噪比(S/N)為3作為檢測下限,結果顯示ICA的最低檢測濃度為0.5μg/mL。4.6 色譜分析條件選擇 淫羊藿提取液中的主要化學成分為淫羊藿苷,還有其它黃酮類化合物存在,因此在上述色譜條件下可出現6~7個峰。為了獲得最佳分離效果,首先用甲醇—水為流動相進行分離,當比例 為55∶45時,雖然ICA與其它化學成分已分離,但其保留時間較長,峰形較寬,且柱壓較高。為此,選用對黃酮類化合物分離選擇性較好的四氫呋喃,并加入一定量的冰醋酸,使弱酸化合物分離效果更佳。經過調整不同比例,多次試驗,最后確定四氫呋喃—水—冰醋酸最佳配比為20∶75∶5。4.7 內標選擇 為能用內標法準確測定ICA濃度,本文對槲皮素、蘆丁、橙皮苷、氨茶堿、阿斯匹林、非那西丁、黃體酮、苯甲酸和蘭萼甲素等13種藥物進行了測定,考察其與ICA在血漿中的分離情況,結果用保留時間小于ICA的藥物選作內標時,往往被血漿中干擾峰所干擾。阿斯匹林、非那西丁均在ICA前1~1.5min出峰,卻被淫羊藿提取液中其它成分所干擾。蘭萼甲素和苯甲酸均在ICA后2~4min出峰,沒有任何峰的干擾,因此二者均可作為內標,考慮到苯甲酸方便易得,故認為選用苯甲酸作為內標更為適宜。4.8 提取溶媒的選擇 本文考察了用乙醇、乙酸乙酸及乙醇—乙酸乙酯(1∶5)為溶媒對ICA進行提取測定,發現前者提取回收率小于60%,而后者雖然提取回收率大于95%,但帶入雜質峰較多,而且色譜系統穩定性下降。因此實驗選用乙酸乙酯為提取溶媒,各生物樣品的提取回收率均大于73%,且方法穩定。4.9 藥物在生物樣品的穩定性 于空白各生物樣品中加入ICA標準品,配制成15μg/mL濃度生物樣品數份,置入-20℃冰箱保存,分別于第0、5、15、30d按實驗方法測定, RSD均小于7.1%, 說明該藥物在各生物樣品中-20℃冰箱保存下,至少可穩定1個月。4.10 血藥濃度的測定 為了檢驗上述方法是否能滿足ICA的藥代動力學研究,應用本方法進行了大鼠靜脈注射淫羊藿提取液。由大鼠頸靜脈按10mg/kg(含ICA)靜脈注射,于給藥后5、10、15、20、25、30、40、60、80、120、180min于頸靜脈各取血0.25mL,肝素抗凝,離心后取血漿0.1mL按上述方法提取和測定ICA濃度,以給藥時間為橫坐標,血漿中ICA的對數濃度為縱坐標繪制藥時曲線,見圖2。血藥濃度測定結果表明,本文建立的分析方法可滿足ICA藥代動力學研究的需要,具有靈敏度高,準確性好等優點。

    相關資料

    在線咨詢
    1024人成网色www_91免费视频网站_黄色亚洲_欧美精品一国产成人性影视

    <form id="xr7lj"><nobr id="xr7lj"><th id="xr7lj"></th></nobr></form>

        <form id="xr7lj"><form id="xr7lj"><th id="xr7lj"></th></form></form>

          <form id="xr7lj"></form>

            国产综合色一区二区三区| 一区在线电影| 欧美顶级艳妇交换群宴| 国产日韩精品在线播放| 国产精品亚洲欧美| 久久超碰97中文字幕| 欧美综合第一页| 国产伦精品一区二区三区视频孕妇| 国产精品综合久久久| 亚洲视频在线观看| 欧美日韩精品欧美日韩精品一| 欧美精品国产精品日韩精品| 有码中文亚洲精品| 久久躁狠狠躁夜夜爽| 国产一区二区三区四区五区美女| 欧美日韩一区二区在线观看视频| 久久精品一区四区| 国模精品娜娜一二三区| 这里只有精品丝袜| 亚洲欧美成人在线| 亚洲欧美在线看| 亚洲国产综合91精品麻豆| 欧美激情2020午夜免费观看| 在线亚洲激情| 欧美日韩1区2区3区| 欧美日韩一区二区在线| 亚洲国产欧美国产综合一区| 久久久久久伊人| 欧美日韩国产在线看| 夜夜狂射影院欧美极品| 久久久久88色偷偷免费| 亚洲综合大片69999| 亚洲欧美日韩在线观看a三区| 国产午夜精品久久久久久免费视| 欧美黄污视频| 久久久久国产免费免费| 欧美日本在线看| 最新成人av网站| 校园春色国产精品| 日韩视频在线永久播放| 9色porny自拍视频一区二区| 亚洲在线网站| 久久精品成人一区二区三区| 国产精品99久久久久久白浆小说| 99热这里只有成人精品国产| 亚洲欧美成人| 亚洲成人在线网| 国内精品美女av在线播放| 欧美一区二区三区播放老司机| 欧美系列电影免费观看| 一区二区三区视频在线播放| 欧美日韩精品伦理作品在线免费观看| 国产亚洲精品7777| 毛片基地黄久久久久久天堂| 久久精品99久久香蕉国产色戒| 国产精品一区二区久久国产| 一区二区三区国产在线观看| 国产精品国码视频| 国外精品视频| 黄色国产精品| 1204国产成人精品视频| 一区二区三区中文在线观看| 亚洲福利av| 国产精品久久久久久久久久久久久久| 久久超碰97中文字幕| 欧美一区91| 午夜在线视频一区二区区别| 久久一区二区三区av| 欧美一区二区视频观看视频| 欧美黄色大片网站| 另类综合日韩欧美亚洲| 中日韩高清电影网| 国产日韩欧美在线观看| 精品91久久久久| 亚洲精品免费在线播放| 一区二区三区 在线观看视| 国语自产精品视频在线看8查询8| 国内精品久久久久久| 亚洲国产另类久久久精品极度| 欧美日韩国产高清视频| 久久久久五月天| 国产目拍亚洲精品99久久精品| 久久久久久亚洲精品不卡4k岛国| 香蕉成人久久| 欧美亚洲网站| 欧美亚洲在线视频| 欧美国产亚洲精品久久久8v| 欧美精品一区在线| 国产亚洲精品久久飘花| 久久综合国产精品台湾中文娱乐网| 亚洲视频在线看| 极品少妇一区二区三区| 日韩视频免费观看高清完整版| 亚洲一区二区精品| 欧美/亚洲一区| 亚洲欧美日韩在线综合| 国产亚洲精品7777| 精东粉嫩av免费一区二区三区| 国产精品午夜电影| 欧美~级网站不卡| 国产亚洲成年网址在线观看| 亚洲欧美制服另类日韩| 欧美亚洲网站| 国产精品日韩欧美一区二区| 裸体丰满少妇做受久久99精品| 在线成人免费视频| 一区二区久久久久| 亚洲精品一线二线三线无人区| 国产欧美精品一区二区三区介绍| 伊人夜夜躁av伊人久久| 99综合电影在线视频| 午夜精品久久99蜜桃的功能介绍| 狠狠色丁香久久婷婷综合丁香| 免费成人你懂的| 中国成人黄色视屏| 亚洲免费在线精品一区| 欧美日韩免费精品| 亚洲激情亚洲| 欧美久久久久久久| 国产性色一区二区| 久久国产精品久久久| 蜜臀av性久久久久蜜臀aⅴ四虎| 伊人婷婷久久| 国产视频在线观看一区二区| 国内精品写真在线观看| 欧美成人免费播放| 国产精品一区二区三区乱码| 国产精品国产三级国产专播精品人| 免费黄网站欧美| 国产精品自拍视频| 久久精品动漫| 欧美色网一区二区| 亚洲精品免费在线观看| 欧美成人在线免费观看| 欧美黄色大片网站| 欧美一区二区三区视频免费播放| 国产亚洲欧美日韩日本| 国产精品入口麻豆原神| 国产亚洲精品综合一区91| 欧美亚洲日本网站| 蜜桃av一区二区三区| 99国产精品久久| 欧美日产国产成人免费图片| 国产日韩精品在线观看| 亚洲精品在线观| 国产精品你懂的在线| 国产精品盗摄一区二区三区| 翔田千里一区二区| 欧美不卡激情三级在线观看| 国产精品久久久久久超碰| 久久国产精品久久久久久久久久| 欧美激情中文字幕一区二区| 欧美男人的天堂| 久久高清福利视频| 性色av一区二区三区在线观看| 日韩一级精品视频在线观看| 亚洲欧洲精品天堂一级| 国产日韩欧美亚洲一区| 亚洲精品欧美极品| 欧美大片国产精品| 欧美日韩国产丝袜另类| 亚洲已满18点击进入久久| 亚洲欧美www| 精品成人乱色一区二区| 欧美成人精品| 亚洲第一区在线观看| 亚洲伊人一本大道中文字幕| 午夜精彩国产免费不卡不顿大片| 国产热re99久久6国产精品| 国产精品国产精品| **网站欧美大片在线观看| 国产精品a久久久久久| 女人香蕉久久**毛片精品| 激情综合网址| 欧美日韩久久精品| 亚洲人成精品久久久久| 欧美美女bbbb| 国产精品亚洲产品| 老司机免费视频一区二区| 国产精品久久久999| 国产一区二区三区日韩| 91久久线看在观草草青青| 午夜一区二区三区不卡视频| 国产精品热久久久久夜色精品三区| 91久久精品国产91性色| 国产一区观看| 久久人人爽人人爽爽久久| 中文精品一区二区三区| 国产精品网站在线| 国产在线视频不卡二| 欧美不卡激情三级在线观看| 国产麻豆一精品一av一免费| 国产欧美日韩三区| 欧美日韩一区二区三区免费看| 国产一区二区三区观看| 影音先锋国产精品| 久久亚洲精品中文字幕冲田杏梨| 亚洲欧美国产va在线影院| 欧美性感一类影片在线播放| 久久久久久久综合色一本|