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  • 離子色譜法同肘測定糖類和有機酸

    發布于 2013/12/17閱讀(1651)來源 zxj標簽 離子色譜

    摘要

    本文介紹用電導和脈沖安培檢測的離子色譜同時測定一元有機酸和糖類的方法.

    內容

      離子色譜法(IC)是一種十分有用的技術,它可以進行痕量無機陰離子、無機陽離子和有機酸的測定。用抑制型離子色譜法測定有機酸已有過報道 一元有機酸如乳酸、乙酸. 乙醇酸、甲酸、丙酮酸能通過陰離子交換柱分離,然后以抑制電導法靈敏地進行檢測。
    脈沖安培檢測器是離子色譜法的一種新的檢測技術,對于易氧化的物質,特別是多羥基物質和糖類,是很有用的測定手段。脈沖安培檢測器與高效陽離子交換柱結合,為糖類的測定提供了快速, 方便和靈敏的分析方法。
    本文描述的離子色譜系統在脈沖安培檢測之后再串連化學抑制器進行電導檢測, 以此對糖類和一元有機酸包括甘露醇,鼠李糖,葡萄糖,果糖、乳糖、蔗糖,棉子糖、麥芽糖、乳酸, 己醇酸、甲酸 丙酮酸進行同時測定。
        實驗部分
        (一)儀器和試劑
        Dionex 4000i型離子色譜儀, 配以電導檢測器和金電極脈沖安培檢測器,Dioncx HPLC-AG6和HPLC-AS6色譜柱。Houston Instruments雙筆記錄儀,HP4270積分儀。Dionex AMMS微膜抑制器。
    各溶液, 包括離子色譜淋洗液, 均以分析純試劑和二次去離子水配制。
        (=)色落條件
        淋洗液0.080mol/L NaOH, 流速I m1/miI1,保護柱HPIC—AG6,分離柱HPIC-AS6,抑制柱AMMS,再生液50mmol/L H2SO4,流速5.0ml/min進樣體積50μl檢測電勢E10.20V,持續時問t1:60ms正清洗電勢E2:0.60V,持續時間t2:60ms, 負清洗電勢Es持續時間t3:3240ms。
        (三)測定方法
        在色譜開始進行之前, 先用電導檢測以確認在不同淋洗掖時各一元有機酸的保留時間。由于選擇的淋洗液濃度較大,必須對淋洗液、再生液和各自的流速進行優化以提供低的背景電導和好的基線。然后,連接各組件,將脈沖安培檢測器連在系統內,以測定各糖類。
        結果與討論
        (一)穩定性和重現性
        對混合十三個組分的標準溶液測定其穩定性和重現性,連續測定九次。
        看出峰高和保留時間均有良好的重現性。不同一天測定時, 也沒有顯著差異。
        (二)檢測限,線性范圍和線性關系
        從結果看用離子色譜法測定以上各物不僅有很低的檢測限,而且有很寬的線性范圍。以峰面積積分值計算,各酸類在0~100μg/ml時的線性關系。
        同樣濃度下,對葡萄糖、果糖, 蔗糖以峰高計算其線性關系如下t葡萄糖Y=1.60c+2.70,r= 0.9997。
        從以上結果看, 各組分均有良好的線性關系, 因此用離子色譜法測定時,準確度較好。
        (三)各組分的色譜分離情況
        按照上述標準條件測定, 典型的色譜圖可見五種酸到達電導檢測器時, 基本不發生重疊現象。而用脈沖安培檢測糖類時,甘露醇與鼠李糖、葡萄糖與果糖、乳糖與蔗糖之間有部分重疊, 但對測定結果影響不大。值得注意的是,當乙酸存在時,乙酸稻乳酸將發生重疊, 難以分辨。
        應用實例
        用此法測定飲料中的糖類和一元有機酸十分方便, 一般不必經過特定的前處理, 只要稀釋后通過0.45μm的濾膜直接進樣,便可進行測定。我們對黃酒和啤酒進行了測定。

     

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