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  • 5種磺胺類藥物殘留的高效液相色譜法

    發布于 2011/08/23閱讀(1720)來源 zxj標簽 液相色譜儀

    摘要

    5種磺胺類藥物殘留的高效液相色譜法

    內容

    5種磺胺類藥物殘留的高效液相色譜法
    (1)試劑和材料 除特別注明外,所用試劑均為分析純;水為超純水。
    ①磺胺類藥物對照晶(SMM、SDM、SMz、SMZ和SQ)
    ②甲醇 色譜純
    ③乙腈 色譜純
    ④正己烷
    ⑤正丙醇
    ⑥無水硫酸鈉
    ⑦堿性氧化鋁SPE柱 每根柱填料量為28
    ⑧磺胺類藥物貯備液(1mg/mi) 分別取上述磺胺類藥物對照晶各約50mg,精密稱定,置同一50ml量瓶,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得。置一20~C以下冰箱中保存,有效期3個月。
    ⑨磺胺類藥物工作液(5Ps/mi) 精密量取磺胺類藥物貯備液o.5ml,置100ml量瓶,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。置一20~C以下冰箱中保存,有效期1個月。
    ⑩磺胺類藥物對照溶液 取磺胺類藥物工作液用流動相稀釋成濃度為o.02gg/ml、0.05Pe/mI、0.1P8/ml、0.2Pg/m1、0.5Pz/ml、1.0鵬/ml的系列對照溶液。置2—8~C冰箱中保存,有效期I周。
    (2)儀器和設備
    ①P1201高效液相色譜儀
    ②離心機
    ③固相萃取裝置(配考克閥
    ④分析天平 精度0.0001g
    ⑤天平 精度0.0lg
    ⑥旋轉蒸發儀
    ⑦振蕩器
    ⑧勻漿機
    ⑨渦動混合器
    ⑩分液漏斗 50ml
    @梨形瓶 lOOml
    ⑩離心管50ml
    ⑩微孔濾膜 0.45um
    (3)測定步驟
    ① 提取和凈化 稱取組織樣品5g(精確到0.1g),加入乙腈25ml,無水硫酸鈉4g,以10000r/min以上的速度均質lmin后,以3000r/ITIIB的速度離心5min。分離后的殘渣再用25ml乙腈處理,振蕩10min后,以3000r/min的速度離心5min。合并兩次的上清液,加入正己烷 30ml,振蕩l0min,靜置分層后,取下層液體,加10mi正丙醇;500c下減壓干燥,殘留物用95%乙腈共4m1分兩次溶解,過Sep—Pek氧化鋁B柱。用95%乙腈5ml過柱,不收集,真空抽干(整個過程控制堿性氧化鋁SPE柱流速在l~2ml/min)。再用70%乙腈l0ml洗脫后,洗脫液中加入5ml正丙醇,500c下減壓干燥后,殘留物用2.0mi流動相溶解,用o.45um濾膜過濾,轉移至進樣小瓶中,待測。
    ②測定
    a色譜條件
    色譜柱:Cis柱,g50mmX4.6mm(內徑),粒徑5um或相當者
    流動相:乙腈—甲醇—水—乙酸(2+2+9+0.2)
    流速;lml/mill
    檢測波長:270nm
    進樣量:20uL
    b.測定 根據樣液中磺胺類藥物含量情況,選定峰面積相近的標準溶液。溶液及試樣溶液中磺胺類藥物的響應值均應在儀器檢測的線性范圍之內,試樣溶液測定過程中應參插注入對照溶液,以便準確定量。
    ③空白試驗 除不加試樣外,按上述測定步驟進行。
    (4)靈敏度和回收率
    本方法的檢測限為50ug/kg。
    在100ug/kg添加濃度水平上,回收率范圍為50%一110%

    P1201高效液相色譜儀由上海本昂科學儀器有限公司生產并提供。
    歡迎來電咨詢 021-61722609  13524850778

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