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  • 固相萃取技術在樣品處理中的應用

    發布于 2018/04/20閱讀(1571)來源 ltrlw

    摘要

    在2003版的“食品衛生檢測方法”標準系列中,有一個較大的改動就是很多項目,尤其是農藥項目的前處理普遍使用了固相萃取技術(詳見表1)?,F針對這一技術的原理、使用和誤區進行探討。

    內容

      一.固相萃取技術簡介
      
      固相萃?。⊿olidPhaseExtraction,簡稱SPE)技術,發展于上世紀70年代,由于其具有高效、可靠、消耗試劑少等優點,在許多領域取代了傳統的液-液萃取而成為樣品前處理的有效手段。
      
      一些傳統的介紹SPE的書籍將其歸于一個液相色譜的原理,這其實是引起使用不當的主要源由之一。把SPE小柱看作一根液相色譜柱,不如把它看成單純的萃取劑更合適,因為:液相色譜的重點在于分離,而SPE的重點在于萃取。
      
      固相萃取技術在樣品處理中的作用分兩種:一是凈化,二是富集,這兩種作用可能同時存在。
      
      固體萃取和液-液萃取相比,其長處在于方便和消耗試劑少,短處在于批次間的重復性難以保證。出現這種情況的原因在于:液體試劑的重復性好,只要其純度可靠,不同年代的產品的物理化學性質都是可靠的。而固體萃取劑就算保證了純度外,還存在著顆粒度的差異,外形的差異等液體試劑不存在的且難以衡量的因素,不同年代不同批號的萃取性質可能會有較大的區別。
      
      從理論上和廠家宣傳來看,固相萃取應該在色譜分析的前處理上得到很好的應用:有機溶劑用得很少,可批量處理樣品,既可富集,又能除雜質,給人印象是前處理的革命性進步。然而現實情況,起碼在國內,雖然推廣了多年,實際應用還是相當有限。
      
      SPE應用得不廣,與我們的使用方式和期望有關,也與它本身的局限有關。對于供應商來說,從經濟利益出發,向來都是忽略固相萃取的局限與不足。固相萃取可以作為前處理手段的一個很好補充,但是在使用時,一定要清醒知道到它的優點和缺點,注意因地制宜,揚長避短。
      
      二、固相萃取的應用優勢
      
      在什么項目的前處理適合使用固相萃取技術,即用固相萃取會比普通的溶劑萃取更理想,個人認為有以下幾種情況:
      
     ?。ㄒ唬┧杏袡C物的前處理。
      
      此類常規處理基本上是用與水不相溶的有機溶劑振蕩萃取,用固相萃取的優勢在于
      
      (1)可以定量地重復前處理過程。
      
      溶劑振蕩的操作一般只能要求到控制時間的程度,卻無法控制振蕩頻率,強度,動作,我們知道,每個人的振蕩動作是不同的,就是同一個人,也很難保證始終劃一的動作。所以說,溶液萃取的動作是不定量,不能重復的。
      
      而在應用固相萃取時,比較容易保持過柱和洗脫速度的均一和穩定,因此,固相萃取的萃取過程是可以重復,可定量的。
      
     ?。?)現場處理。
      
      水中有機物的分析有一個長期困擾我們的瓶頸。即有機物在池塘水庫等環境中能保持相對穩定,但是一旦進入采樣瓶這個小環境中,就會迅速發生變化,所以很多水的有機物分析方法要求即采即分析,最多不能超過4個小時,可一般的情況是,從取水回到實驗室的時間就遠遠不止4小時了,樣品發生了變化,分析結果的可靠性可想而知。
      
      如果引入固相萃取技術,由于其設備簡單,體積小,易于攜帶,完全可以做到在現場一邊采樣,一邊進行前處理。采樣者帶回實驗室的是固相萃取柱,而不是水樣。這樣就能保證我們處理的是真正成份穩定的水樣。
      
      從實際應用來說,在水的檢測中用固相萃取技術取代傳統液液萃取還有相當的工作需要摸索,目前尚不能完全取代,但是其發展的前景很值得看好。
      
     ?。?)有機試劑消耗量的減少。
      
      在處理水樣時,如果用固相萃取,則只需要在洗脫時用到有機溶劑,用量比傳統液液萃取要少數十倍以上。對于實驗者的人身保護和環境保護有著積極的意義。
      
     ?。ǘ┡可锊牧系乃幬锍煞州腿?/span>
      
      這是固相萃取在實際應用中比較成功的范例,主要是指在醫院中檢測血樣和尿樣時的前處理工作,由于對藥物成份的吸附是固相萃取的優勢,加上樣品單一,組成固定,在確定方法后很適合大規模批量的凈化操作。
      
     ?。ㄈ┟庖哂H和固相萃取。
      
      萃取的理想狀態就是特異性富集或特異性排斥,可是不論是溶液萃取還是固相萃取,基本上是相似相溶的,最多做到“某一類”層次上的萃取,而無法達到“某一種”層次的萃取。
      
      在固相萃取柱的基礎上加上免疫親和技術,可以利用其生物特異性選擇吸附,能夠達到近于理論的完美萃取。

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